午夜毛片在线观看_午夜福利蜜桃青_午夜女成人精品视频在线_午夜想想爱午夜剧场

產(chǎn)品展示PRODUCTS

您當(dāng)前的位置:首頁 > 產(chǎn)品展示 > 實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù) > 分子實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù) > 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化技術(shù)服務(wù)
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化技術(shù)服務(wù)

質(zhì)粒轉(zhuǎn)化技術(shù)服務(wù)

簡(jiǎn)要描述:
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化技術(shù)服務(wù):將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過程稱為轉(zhuǎn)化( Transformation )。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀(感受態(tài)細(xì)菌的制備,見前)。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面,經(jīng) 42℃ 短時(shí)間熱沖擊處理,促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物。

更新時(shí)間:2024-07-25

訪問量:398

廠商性質(zhì):其他

將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過程稱為轉(zhuǎn)化( Transformation )。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀(感受態(tài)細(xì)菌的制備,見前)。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面,經(jīng) 42℃ 短時(shí)間熱沖擊處理,促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物。在豐富培養(yǎng)基上生長(zhǎng)數(shù)小時(shí)后,球狀細(xì)胞復(fù)原并分lie增殖。被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中,外源基因得到表達(dá)。在選擇性培養(yǎng)平板上,可選出所需的轉(zhuǎn)化子(即含有質(zhì)粒 DNA 的細(xì)菌)。鈣處理的感受態(tài)細(xì)胞,一般每微克 DNA 能獲得 10 5 ~ 10 6 個(gè)轉(zhuǎn)化子。除化學(xué)方法轉(zhuǎn)化細(xì)菌外,還有電穿孔法( Electroporation ),其轉(zhuǎn)化率可高達(dá) 10 9 ~ 10 10 個(gè)轉(zhuǎn)化子 /μg 質(zhì)粒 DNA 。

二、實(shí)驗(yàn)器材

1.培養(yǎng)皿

2.恒溫培養(yǎng)箱

三、試劑

1.LB 培養(yǎng)基

2.選擇性 LB 瓊脂培養(yǎng)平板(含氨芐qms,終濃度為 50μg/ml )

3.氨芐qms 100 mg/ml

4.宿主細(xì)菌:經(jīng) 100 mmol/L CaCl 2 處理的感受態(tài)細(xì)菌 DH5α

四、操作步驟

1、取50μL大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞,加入適量質(zhì)粒(體積不得超過4μL)冰浴30min后42℃熱激90s ,馬上放回冰上,冰浴2min ;

2、加400μLLB培養(yǎng)基,于37℃搖床慢搖振蕩培養(yǎng)45-60min;

3、取50-100μL涂在含有氨芐qms(100μg/mL)的LB固體培養(yǎng)基上,37℃倒置培養(yǎng)過夜。



留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7
海原县| 澄城县| 武清区| 河西区| 天水市| 清苑县| 江永县| 乌兰浩特市| 连江县| 崇州市| 南充市| 济阳县| 仪陇县| 湖北省| 阜新市| 雷波县| 白沙| 昆山市| 长宁县| 托克逊县| 兰溪市| 凤翔县| 岳阳市| 桐城市| 大足县| 科技| 潼关县| 电白县| 楚雄市| 松滋市| 抚宁县| 蒲城县| 红河县| 察雅县| 昌宁县| 北京市| 渭源县| 来安县| 南木林县| 宝丰县| 老河口市|