HE染色實驗簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中zui基本、使用zui廣泛的技術方法。
HE染色實驗步驟:一般包含取材固定,脫水透明,浸蠟包埋,切片與貼片,脫蠟染色,脫水透明,封固等步驟。
1、石蠟切片脫蠟至水
依次將切片放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。
2、蘇木素染細胞核
切片入Harris蘇木素染3-8min,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,0.6%氨水返藍,流水沖洗。
3、伊紅染細胞質(zhì)
切片入伊紅染液中染色1-3min。
4、脫水封片
將切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-無水乙醇Ⅰ5min -無水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脫水透明,將切片從二甲苯拿出來稍晾干,中性樹膠封片。
5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析
實驗結果
細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。