-
成年小鼠關節(jié)軟骨細胞原代培養(yǎng)
發(fā)布時間： 2024-03-19 點擊次數(shù)： 915次1. C57小鼠，8-10周，通過頸椎脫位處死，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉移到通風柜中的解剖盤中。
2. 使用眼科剪和鑷子，使髖關節(jié)脫臼，保持股骨頭完整。
3. 用止血鉗去除每個股骨頭的軟骨帽，將組織放入含2%雙抗的PBS中。
4. 用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍，將關節(jié)軟骨小心移到2ml離心管中。
5. 用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片，加入3ml預熱的Collagenase D（1.5mg/ml）。
6. 放入37℃、80rpm的搖床中進行第一次消化，時間2h 。
7. 第一次消化結束后，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，40um的細胞篩過濾后，離心1500rpm，2min。
8. 沉淀用DMEM培養(yǎng)基重懸，計數(shù)，種植在24孔板中。
9. 在未消化的組織中加入3ml預熱的Collagenase D，放入37℃、80rpm的搖床中進行第二次消化，時間2h，然后收集細胞。
- 下一篇：大鼠灌胃操作
- 上一篇：大鼠骨髓來源的內皮祖細胞體外培養(yǎng)方法
技術支持：環(huán)保在線 地址：上海市寶山區(qū)長江南路180號B區(qū)B650 管理登陸 sitemap.xml
微信二維碼
