尼氏染色實驗是伊萊博生物病理平臺實驗組成之一,作為常見病理實驗,日常實驗之一。病理實驗由從事生物實驗專業(yè),經(jīng)驗豐富的人員進行操作。
尼氏染色實驗主要是進行組織形態(tài)觀察,其結果通過照片形式展現(xiàn)。通過對組織形態(tài)觀察,了解實驗結果,驗證實驗結果,對后續(xù)實驗進行把控等。
尼氏染色法是用堿性染料染神經(jīng)組織的一種方法。尼氏體是胞質(zhì)內(nèi)的一種嗜堿性物質(zhì),廣泛分布于各種神經(jīng)元中,不同神經(jīng)元中的尼氏體形狀、大小和數(shù)量都各有差異。尼氏染色法可以染出尼氏體,用來觀察神經(jīng)元內(nèi)的細胞結構,還可以通過對尼氏體的觀察來了解神經(jīng)元的損傷情況。用于尼氏染色的堿性染料主要有焦油紫、亞jia藍、甲苯胺藍和硫堇等。在此以甲苯胺藍染料為例,對小鼠腦組織進行尼氏染色。
(1)石蠟或冰凍切片依次經(jīng)二甲苯、無水乙醇、95%酒精、80%酒精、70%酒精和蒸餾水,各自時間可以參考HE染色。
(2)1%焦油紫或1%硫堇染色10min至1h。
(3)蒸餾水清洗。
(4)70%酒精分色數(shù)秒至數(shù)分鐘。
(5)依次經(jīng)70%酒精、80%酒精、95%酒精,各2min脫水。
(6)無水乙醇2次,每次5min。二甲苯2次,每次10min。
(7)DPX封片。尼氏體呈紫色、細胞核呈淡紫色